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凝膠成像系統的功能與應用

凝膠成像系統的功能與應用範圍:凝膠成像系統是實驗室常用的一種儀器,其應用範圍極其廣泛。總的來說,凝膠成像系統可以用于:蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析;确定生物分子的分子量;用于生物分子的定量分析。

不同種類凝膠成像系統的應用範圍有哪些區别?

按照凝膠成像系統的類别分類的各自應用範圍如下:

(1)普通凝膠成像分析系統:可以對蛋白電泳凝膠,DNA凝膠樣品進行圖象采集并進行定性和定量分析,樣品包括:EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監測;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質凝膠如考染等。成像範圍涵蓋UV,EB和有色及可見樣品成像;

(2)化學發光成像分析系統:成像範圍涵蓋UV,EB,化學發光、紫外-熒光、有色及可見樣品成像;

(3)多色熒光成像分析系統:成像範圍涵蓋UV,EB,化學發光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像;

(4)多功能活體成像分析系統:UV,EB,化學發光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動物,及大型動物。

凝膠成像系統具體可以用于哪些實驗分析?

具體從使用分析的角度來看,凝膠成像系統可以應用于分子量計算,密度掃描,密度定量,PCR定量等生物工程常規研究。

1)分子量定量 

對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成拟合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要準确很多。 

(2)密度定量 

一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它隻能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統和軟件,先将DNA膠片上某一已知其DNA含量的标準條帶進行密度标定以後,可以方便的單擊其他未知條帶,根據與已知條帶的密度做比較,可以得到未知DNA的含量。此方法也适用于對PAGE蛋白膠條帶的濃度測定。

(3)密度掃描 

在分子生物學和生物工程研究中,**常用到的是對蛋白表達産物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統的方法是利用專用的密度掃描,但利用生物分析軟件,結合白光照射的凝膠成像獲取圖片,就能完成此項工作。 

(4)PCR定量 

PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那麼可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量并計算其占總和的百分數,密度掃描時對選擇區域生成縱向掃描曲線圖并積分。

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